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《贵州省医学会肾脏病学分会暨血液净化分会学术年会论文集》2018年
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DENV-2感染的HUVECs与调节性T细胞相互作用对主要炎性细胞因子产生的影响

陈俊豪  左丽  袁静  毛佳璇  孔维莹  来涛  罗玉  
【摘要】:目的:研究人原代脐静脉内皮细胞(primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)被DENV-2感染后,与调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)共培养,HUVEC与Treg细胞相互作用对各自主要炎性细胞因子的影响。方法:用密度梯度离心法从人浓缩白细胞分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),磁珠阴性分选Treg细胞,流式细胞术检测CD4~+CD25~+CD127~+细胞纯度。HUVECs经DENV-2感染后,用Transwell与Treg细胞共培养,对照组用磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate S1P)1型特异性受体激动剂CYM-5442预处理24h去除药物后感染病毒,并与Treg细胞共培养,Real-time RT-PCR分别检测HUVECs的IL-6、IL-8、TNF-αmRNA和Treg细胞的IL-10、TGF-βmRNA转录水平;双抗体夹心ELISA法检测培养上清中上述细胞因子表达。结果:感染后HUVECs中DENV2 NS1基因转录水平逐渐上升,在24h达到峰值(3.03±0.26,P0.01)后下降。流式细胞术检测经免疫磁珠阴性分选的Treg细胞纯度为84.3±0.5%。DENV-2感染后HUVECs的IL-6、IL-8、TNF-αmRNA转录均有上调,感染后24h mRNA的转录量IL-6为16.64±2.64;IL-8为26.80±5.81;TNF-α为5.25±0.42,而未感染组的转录水平分别为IL-6 1.70±0.68;IL-8 1.68±0.74;TNF-α1.45±0.15,与Treg共培养后上述细胞因子在各时间点的转录有所降低,但仍高于未感染DENV-2的对照组。CYM-5442预处理后被感染的HUVEC IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA转录水平显著下降;共培养的Treg细胞所产生的IL-10、TGF-β也下调。结论:被DENV-2感染的原代HUVECs能增强Treg细胞IL-10与TGF-β的分泌,同时Treg细胞产生的抑制性细胞因子能降低被感染的HUVECs炎性细胞因子的产生。
【作者单位】:贵州医科大学免疫学教研室
【基金】:国家自然科学基金(81560263) 贵州省教育厅“125”重大科技专项(黔教合重大专项字[2012]008号)~~
【分类号】:R392

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